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影响蛇毒抗原抗体反应的因素

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   2015-04-06 1930
核心提示:合适的温度可加速蛇毒抗原与其抗体的结合和增快出现反应的速度,一般在15C〜 4CTC为宜,最适温度为371:。56€以上反而使抗原抗体复合物解离,又易破坏补体,60X: 以上则造成抗体球蛋白变性及某些抗原破坏。

()温度

合适的温度可加速蛇毒抗原与其抗体的结合和增快出现反应的速度,一般在15C 4CTC为宜,最适温度为371:。56€以上反而使抗原抗体复合物解离,又易破坏补体,60X 以上则造成抗体球蛋白变性及某些抗原破坏。

温度的影响主要是因为温度升高可使反应物抗原抗体分子运动加快,以使抗原与抗 体碰撞机会增多,从而易相遇结合,也可促进二阶段反应中抗原抗体及其介质的相互作 用,加速出现反应现象。所以蛇毒的抗原抗体反应最好是在37'C左右进行。

(二) pH

不同pH可影响反应物的电离及电荷性质,特别是对抗体球蛋白的电离及带电性能 影响较大。反应物在等电点的pH环境中不带电荷,此时不起反应或出现非特异性沉淀。 免疫球蛋白的等电点为PH4. 86. 6,抗原抗体反应最适pH6. 08. 0,若低于pH3. 0 以下,则发生非特异的酸凝集。

(三) 电解质

血清学反应中需要适量的电解质,如无电解质存在则不出现可见反应。蛇毒抗原和抗 体的结合可不需要电解质帮助,但抗原抗体结合物的凝聚反应或沉淀反应以及补体结合 反应等必需电解质存在。因为蛇毒抗原抗体都是蛋白质,它们在溶液中都属于胶体物质, 带有电荷。胶体粒子又有许多强极性基团(如羧基、氨基及肽链等),它们与水有很强的亲 和力,以致在粒子外周构成水层,称为亲水胶体。所以亲水胶体比不带水层的疏水胶体溶 解度高。抗体和抗原未结合时都属于亲水胶体,但当二者相对应的极性基团(如竣基、氨基 )互相吸附后,不能再和水分子结合,因而失去亲水的性质变为疏水胶体,这时易受电解 质的中和作用,失去电荷,降低其电势而互相聚集,呈现各种可见反应。这种抗原抗体反应 的速度随着盐类浓度增高而加快,最适的浓度是0. 85%生理盐水等渗溶液。过高浓度的 盐溶液(15%)反而妨碍抗原抗体结合,并可使抗原抗体凝集物或沉淀物解离。更高浓度的 盐溶液(半饱和至饱和)可完全消除反应物上电荷,即使是单纯的抗原或抗体,也会发生特 异性沉淀,称为盐析。

(四) 振动和搅拌

振动和搅拌可以显著增高抗原抗体反应速度,明显地加速抗原抗体结合物的互相凝 聚,因为增加了反应物碰撞和接触的机会,而且它的作用与反应物颗粒大小呈正比。振动 或搅拌可使蛇毒和其抗体的沉淀反应及间接天然胶乳凝体反应的速度加快一倍多。

(五) 其他因素

非特异性血清蛋白含量过高会影响、阻碍或延缓抗原抗体反应,这是由于它对胶 乳的保护作用以及增加反应液的粘度之故。这在蛇毒与抗体的间接天然胶乳反应和血凝 反应中最为明显。

类脂质除去抗体血清中的类脂质,可阻碍凝集物和沉淀物的生成。类脂质对抗原 与抗体的结合并不重要,但对结合物的凝聚则十分重要,其原理尚不明。

糖类高浓度的糖妨碍抗原与抗体生成凝集物或沉淀物。高分子的右旋糖酐可使 红细胞发生自凝。

蛇毒类某些蛇毒如眼镜蛇毒是一种强碱性的蛋白质或多肽,易造成载体颗粒( 天然胶乳等)非特异性凝集。当强碱性蛇毒作为被检物进行间接载体(天然胶乳)抑制试验 时,在反应液中含量较高的情况下,易发生非特异性凝集而出现假阳性。蛇毒的强碱性 PLA2能水解红细胞膜磷脂释放溶血磷脂,引起溶血(也可能与其分子中含有较高的电荷 有关)。因此,用含有强碱性PLA2的蛇毒致敏血细胞时,要注意瑢血的发生。

 

作者:何国昌@养蛇研究中心

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